In experimenten met polymerasekettingreactie (PCR) beïnvloedt de verpakking van reagentia en monsters direct de nauwkeurigheid en veiligheid van experimentele resultaten. Standaard PCR -verpakkingsprocedures moeten zich strikt houden aan de principes van steriliteit, verontreinigingspreventie en duidelijke etikettering. Specifieke procedures worden hieronder beschreven.
1. Voorbereiding
Draag voordat u verder gaat, een laboratoriumjas, handschoenen en een masker om een schone omgeving te garanderen (een schone bank of bioveiligheidskast wordt aanbevolen). Controleer of alle verbruiksartikelen (bijv. Centrifuge -buizen, PCR -platen) vrij zijn van DNase/RNase -verontreiniging en gebruik Autoclaved of Enzym - gratis sterilizers. Reagentia (bijv. Primers, sjabloon -DNA, enzymen, enz.) Moeten worden opgedragen in individuele flesjes om herhaalde bevriezing te voorkomen - dooi cycli.
2. Aliquoting en labeling
Aliquoting -reagentia: gebruik een pipet om mastermix, primers, etc. te geven in centrifugebuizen of PCR -plaatputten volgens experimentele behoeften, waarbij elk volume nauwkeurig wordt afgegeven aan de dichtstbijzijnde microliter. Gebruik wegwerppipet -tips om kruising - te voorkomen.
Labelingsnormen: alle containers moeten duidelijk worden gelabeld met de naam, concentratie, datum en operatornummer. Waterdichte labels of directe gravure worden aanbevolen om onleesbare markeringen te voorkomen.
3. Verpakking en afdichting
Draai na het aliquoting de centrifugebuisdoppen onmiddellijk vast of sluit de PCR -platen (met behulp van warmte - afdichtingsfilm of gespecialiseerde lijmfilm) om lekkage te voorkomen. Voor lange - term opslag, wordt het aanbevolen om de verpakking in een verzegelde zak te plaatsen en een droogmiddel (zoals silicagelbellen) toe te voegen om een droge omgeving te behouden.
4. Opslag en transport
Na de verpakking moeten PCR-reagentia afzonderlijk worden bewaard op - 20 graden (lang - term) of 4 graden (korte termijn) om temperatuurschommelingen te voorkomen. Transport moet worden uitgevoerd in een geïsoleerde container gevuld met dempingsmateriaal om schokken en lekkage te voorkomen. Voor biologische monsters is de naleving van de vereisten voor bioveiligheid in het kader van de VN 3373 of relevante voorschriften vereist.
Gestandaardiseerde PCR -verpakkingsprocedures zijn essentieel voor experimentele betrouwbaarheid. Strikte aseptische controle en duidelijke etikettering kunnen de risico's van verontreinigingen effectief verminderen en de nauwkeurigheid van gegevens waarborgen.
